RNase A作为一种重要的核糖核酸内切酶,在分子生物学领域发挥着关键作用。其特异性降解RNA的能力使其在质粒DNA和基因组DNA制备、RNA酶保护分析、RNA干扰等实验中具有广泛的应用。翌圣生物的RNase A产品以其高活性、稳定性和广泛的适用性,为相关领域的研究人员提供了可靠的选择。随着分子生物学技术的不断发展,RNase A及其相关产品将在更多领域展现出其应用价值。
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RNase A的来源
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动物来源
RNase A,即核糖核酸酶A,主要来源于牛胰腺。它是一种单链多肽化合物,含有4个二硫键,分子量约为13.7 kDa。这种酶具有高度的稳定性和广泛的反应条件适应性,能够在多种环境条件下保持其活性。牛胰来源的RNase A粉末无法完全去除DNase和蛋白酶,但是在RNase A配置成溶液的过程中进行加热,可去除DNase和蛋白酶,后续可用于去除DNA样品中残留的RNA,或蛋白样品中的核酸残留。
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重组来源
重组核糖核酸酶A,His-tagged(rRNase A ,His-tagged)为来源于Bovine pancreas的RNase A基因在大肠杆菌中的表达产物,经包涵体变复性后,再经亲和层析和离子交换层析等多步纯化所得。纯化的RNase A无DNase和蛋白酶污染,无动物源性。可用于去除DNA样品中残留的RNA,或蛋白样品中的核酸残留。
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RNase A的作用原理
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特异性识别底物
RNase A主要识别单链RNA分子中的嘧啶碱基(胞嘧啶和尿嘧啶)的3’端位置,并在其3’端进行切割。
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催化位点结合与水解反应
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反应条件
RNase A的作用条件相对宽松,pH值范围在中性或弱碱性(pH=7.0~8.0),作用温度在37℃左右。它具有广泛的pH适用范围和热稳定性,且经过高温或变性剂作用后也容易复性。此外,它在低浓度离子环境(NaCl/KCl)中可增强其活性,在高离子浓度中(>300 mM)其反应活性可能会被抑制。
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RNase A的应用场景
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质粒DNA和基因组DNA制备
在质粒DNA和基因组DNA的制备过程中,RNA的存在可能会干扰后续实验的结果。因此,在提取DNA时,通常会添加RNase A来降解样品中的RNA分子,从而获得纯净的DNA样本。由于RNase A对DNA分子不具有降解作用,因此可以确保DNA分子的完整性和浓度不受影响。
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RNA酶保护分析
RNA酶保护分析法(RNase protection assay)是一种近年来发展起来的检测RNA的杂交技术。其基本原理是利用单链RNA探针与待测的RNA样品进行杂交形成RNA:RNA双链分子,由于RNase A可专一性地降解未杂交的单链RNA,而双链受到保护不被降解,经凝胶电泳可以确定目的RNA的长度。该方法灵敏度较Northern杂交法更高,并可进行较为准确的定量。
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RNA干扰研究
RNA干扰(RNAi)是一种通过小分子RNA(如siRNA、miRNA)调控基因表达的技术。在RNAi实验中,外源或内源RNA可能干扰实验效果。RNase A可降解非特异性RNA,降低背景噪音,从而提高RNAi的特异性和效率。
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蛋白质-RNA相互作用研究
在研究蛋白质与RNA的相互作用时,需去除未结合的RNA。RNase A可特异性降解游离RNA,保留与蛋白质结合的RNA,便于后续分析。例如,在RNA结合蛋白(RBP)的研究中,通过RNase A处理后,结合蛋白的RNA纯度提高了50%,有助于解析蛋白质-RNA的相互作用机制。
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RNA疫苗研发
RNA疫苗的制备需确保RNA的完整性和纯度。RNase A可用于去除制备过程中的RNA杂质,提高疫苗的质量和安全性。例如在新冠疫苗研发中,RNase A处理后的RNA疫苗在动物实验中表现出更高的免疫原性和更低的副作用。
翌圣生物RNase A,来源于来源于牛胰腺,产品具有较高的酶活和稳定性。该产品有粉末形式和液体形式,干粉形式-25℃~-15℃储存,有效期2年;液体形式-25℃~-15℃储存,有效期1年。
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产品推荐
产品介绍 |
酶活 |
货号 |
规格 |
价格 |
应用 |
Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺;经色谱工艺制备,DNase 活性含量极低。为冻干粉剂。贮存温度-25℃~-15℃。有效期2年。 |
≥80 Kunitz units/mg |
10407ES |
10407ES60:100 mg |
385 |
质粒DNA和基因组DNA制备、RNA酶保护分析、RNA干扰等实验中具有广泛的应用 |
Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺;DNase I Free;液体形式,RNase A浓度100 mg/mL 。贮存温度-25℃~-15℃。有效期1年。 |
≥80 Kunitz units/mg |
10406ES |
10406ES03:1 mL |
685 |
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Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺;DNase I Free;液体形式,RNase A浓度10 mg/mL 。贮存温度-25℃~-15℃。有效期1年。 |
≥80 Kunitz units/mg |
10405ES |
10405ES03:1 mL |
85 |