

蛋白质免疫共沉淀
产品名称: 蛋白质免疫共沉淀
英文名称: Protein Co-Immunoprecipitation
产品编号: llc846
产品价格: 询价
产品产地: 中国北京
品牌商标: 百泰派克生物科技
更新时间: 2025-05-02T11:31:37
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蛋白质免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation, Co-IP)是一种用于研究蛋白质相互作用的经典生物化学技术。该方法基于抗原-抗体特异性结合原理,通过使用特异性抗体富集目标蛋白并同时捕获与其相互作用的蛋白质,从而识别蛋白质复合物的组成。蛋白质免疫共沉淀能够在接近生理条件的环境下研究蛋白质之间的直接或间接相互作用,为解析细胞信号通路、蛋白质复合物组成及蛋白质功能提供了强有力的实验手段。该技术应用在细胞生物学、分子生物学、蛋白质组学等多个研究领域,特别是在探索疾病机制、发现新的蛋白质相互作用网络以及药物靶点验证等方面发挥了不可替代的作用。在蛋白质免疫共沉淀实验中,抗体的选择是实验成功的关键因素。高质量的单克隆或多克隆抗体能够确保目标蛋白的特异性捕获,同时避免交叉反应。此外,样本的裂解条件也需要精心优化以维持蛋白质相互作用的完整性。一般而言,温和的裂解缓冲液(如非离子去垢剂缓冲液)有助于保持蛋白质复合物的稳定性,而强裂解条件可能导致蛋白质复合物解离,从而影响实验结果。非特异性蛋白质吸附问题也需要通过适当的洗涤条件和封闭试剂(如BSA或非特异性IgG对照)进行优化,以提高实验的特异性和重复性。
蛋白质免疫共沉淀的核心原理在于利用抗体的高度特异性将目标蛋白及其结合的蛋白质复合物从复杂的细胞裂解液中选择性沉淀出来。实验通常包括以下几个关键步骤:首先,细胞或组织样本经过裂解释放出可溶性蛋白质。然后加入特异性抗体,使其与目标蛋白结合,并通过与抗体结合的蛋白A/G磁珠或琼脂糖珠富集目标蛋白复合物。随后,通过洗涤步骤去除非特异性结合的蛋白质,最后进行蛋白质的解析,如SDS-PAGE、电泳、西方印迹(Western blot)或质谱分析以鉴定共沉淀的蛋白质成分。蛋白质免疫共沉淀能够高效、稳定地捕获生理环境中的蛋白质相互作用,为研究动态蛋白复合物提供了理想的方法。
蛋白质免疫共沉淀在蛋白质相互作用研究中具有很高的可靠性。与其他蛋白质相互作用分析方法(如酵母双杂交、荧光共振能量转移等)相比,Co-IP能够在接近生理条件的环境下研究蛋白质复合物,避免了人工重组蛋白可能带来的构象变化,从而更真实地反映细胞内蛋白质相互作用的状态。此外,蛋白质免疫共沉淀还能捕获间接相互作用的蛋白质,即通过中间蛋白桥接形成的蛋白质复合物,从而揭示更广泛的蛋白质相互作用网络。然而,该方法对实验条件的依赖性较强,包括抗体的质量、蛋白质的稳定性以及非特异性结合的控制等,这些因素都会影响实验结果的可靠性。
蛋白质免疫共沉淀的后续分析通常依赖于Western blot或质谱技术。Western blot能够验证特定蛋白质的相互作用,但需要事先知道可能的结合蛋白,而质谱分析则可以对共沉淀的蛋白质进行大规模筛选,发现潜在的新相互作用蛋白质。近年来,结合高分辨率质谱和生物信息学分析,该技术已被广泛应用于构建复杂的蛋白质互作网络,推动蛋白质组学研究的发展。
值得注意的是,蛋白质免疫共沉淀实验在解析动态蛋白复合物时需要考虑时间和空间因素。许多蛋白质相互作用是瞬时且可逆的,受细胞状态、信号传导以及环境因素的影响。因此,在实验设计时,研究人员需要根据目标蛋白的特性选择合适的细胞刺激条件、时间点及实验参数以获取最具生物学意义的结果。此外,由于某些蛋白质复合物可能较为脆弱,实验过程中可使用交联剂(如甲醛、BS3)增强蛋白质相互作用的稳定性,确保共沉淀复合物的完整性。
百泰派克生物科技提供高质量的CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析服务,结合先进的质谱分析技术,我们为客户解析蛋白质相互作用网络提供精准的数据支持。无论是基础研究、疾病机理探索,还是新型靶点筛选,我们都能为您提供可靠的技术保障,助力您的科研突破。
百泰派克生物科技特色项目
一、蛋白测序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对蛋白质的氨基酸组成分析,N端测序,C端测序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质,提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务,对蛋白序列进行分析。
※服务优势:
1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;
3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;
4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;
5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;
6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。
二、蛋白质组学
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。
※服务优势:
1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;
2.体内体外多种蛋白质标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;
3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;
4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;
5.专业生物信息学分析,分析更系统准确。
三、单细胞质谱流式技术分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。
※服务优势:
1.技术先进,填补技术空白
采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。
2.分析数量大,成本较低
单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。
3.应用前景大
①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;
②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;
③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现
百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。
五、生物药物表征
百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。
百泰派克生物科技七大检测平台
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
5.服务3000+企业,10000+客户的选择;
6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!